目的 构建含有人核糖核酸酶抑制因子(hRl)基因的重组腺病毒载体.方法 以含有全长cDNA的pT7-RI为模板,PCR扩增hRI,经T载体克隆后,酶切亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,在BJ5183细菌内和pAdEasy-1同源重组.筛选阳性克隆,酶切、PCR及测序鉴定,线性化后脂质体法转染293细胞进行包装、扩增.通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR扩增目的 基因等方法鉴定重组的腺病毒.结果 酶切鉴定及PCR结果证明hRI基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度为1.5×10<'10>pfu/ml.结论 应用细菌内同源重组法成功构建了含hRI,基因的重组腺病毒载体.
作者：刘鹏；赵宝昌；樊建慧；田余祥；杨帆；崔秀云
来源：中国微生态学杂志 2008 年 20卷 6期
