目的 构建含幽门螺杆菌(H.pylori)热休克蛋白A编码基因的重组载体,并电转入乳酸乳球菌MG1363,表达目的 蛋白并分析其免疫原性,为H.pylori基因工程口服疫苗的研究和开发奠定基础.方法 以H.py-lori NCTC 11637株基因组DNA为模板,PCR扩增hspA基因,并克隆至乳酸乳球菌表达载体pMG36e中.将重组质粒转化E. coli DH5α,经鉴定的阳性重组质粒命名为pMG36e/hspA.以电穿孔法将pMG36e/hspA转化乳酸乳球菌MG1363并用Western blot检测HspA蛋白的表达.结果克隆重组后得到pMG36e/hspA.将pMG36e/hspA电转化MG1363后,收集菌体蛋白进行Western blot分析,在HspA的相对分子质量(Mr≈13 kDa)处出现特异性条带.结论 首次成功构建了表达 H.pylori HspA的重组乳酸乳球菌MG1363,为进一步口服疫苗的相关研究奠定了基础.
作者：龚芳红；贺松；张德纯；刘明方；郭亚楠
来源：中国微生态学杂志 2010 年 22卷 2期
