目的 探索融合有锚定序列的EGFP蛋白,能否通过体外混合展示于乳酸乳球菌MG1363表面.方法 采用融合PCR方法扩增带有锚定序列的egfp(3LysM-egfp),亚克隆至pMD18T载体,测序正确后,插入表达载体pET28a转化BL21(DE3)进行诱导表达、纯化,将纯化的3LysM-EGFP与乳酸乳球菌进行体外混合作用,荧光显微镜及Western-blot检测展示效果.结果 成功构建表达重组菌pET28a-3 LysM-egfp/BL21并诱导出可溶性3LysM-EGFP,纯化后蛋白纯度达到81.5％,荧光显微镜及Western-blot均检测到展示的目的蛋白.结论 纯化后的3 LysM-EGFP能在体外条件下展示在乳酸乳球菌表面.
作者：冯金；洪愉；毛普加；冯梦蝶；许泽仰；黄芬；井申荣；曾韦锟
来源：中国微生态学杂志 2014 年 26卷 5期
