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目的:探讨内皮祖细胞(EPCs)移植在细菌内毒素脂多糖(LPS)所致脓毒症中的治疗作用。方法选择同遗传背景的清洁级雄性SD大鼠60只,按随机数字表法将大鼠分为对照组、模型组和EPCs移植组3组,每组20只。尾静脉注射LPS 5 mg/kg诱导脓毒症模型,对照组注射等量生理盐水。分离、培养、鉴定大鼠EPCs,用绿色荧光蛋白腺病毒转染标记EPCs。EPCs移植组于LPS注射后1 h经尾静脉注入荧光标记的EPCs悬液,活体成像仪及冰冻切片检测组织中荧光标记的EPCs表达。移植后7 d解剖大鼠经腹主动脉采血,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血白细胞介素(IL-6、IL-10)水平;取肺、肝及肾组织,检测各组织湿/干质量(W/D)比值,苏木素-伊红(HE)染色观察各组织病理学改变,实时反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组织Toll样受体4(TLR4)mRNA表达。结果流式细胞仪检测培养第5代时EPCs细胞CD133、CD34的双标记阳性率为99.0

作者:徐喜媛;杨敬平;那仁格日勒;乌日娜;田红军;宋慧芳;王慧

来源:中华危重病急救医学 2015 年 6期

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徐喜媛;杨敬平;那仁格日勒;乌日娜;田红军;宋慧芳;王慧
来源:
中华危重病急救医学 2015 年 6期
标签:
内皮祖细胞 干细胞移植 脓毒症 炎症反应 Toll样受体4 大鼠 Endothelial progenitor cell Stem cell transplantation Sepsis Inflammatory reaction Toll-like receptor 4 Rat
目的:探讨内皮祖细胞(EPCs)移植在细菌内毒素脂多糖(LPS)所致脓毒症中的治疗作用。方法选择同遗传背景的清洁级雄性SD大鼠60只,按随机数字表法将大鼠分为对照组、模型组和EPCs移植组3组,每组20只。尾静脉注射LPS 5 mg/kg诱导脓毒症模型,对照组注射等量生理盐水。分离、培养、鉴定大鼠EPCs,用绿色荧光蛋白腺病毒转染标记EPCs。EPCs移植组于LPS注射后1 h经尾静脉注入荧光标记的EPCs悬液,活体成像仪及冰冻切片检测组织中荧光标记的EPCs表达。移植后7 d解剖大鼠经腹主动脉采血,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血白细胞介素(IL-6、IL-10)水平;取肺、肝及肾组织,检测各组织湿/干质量(W/D)比值,苏木素-伊红(HE)染色观察各组织病理学改变,实时反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组织Toll样受体4(TLR4)mRNA表达。结果流式细胞仪检测培养第5代时EPCs细胞CD133、CD34的双标记阳性率为99.0