目的 以“缺血/再灌注-高迁移率族蛋白B1-内质网应激”(I/R-HMGB1-ERS)为切入点,探讨HMGB1参与脑I/R损伤中ERS的机制.方法 取出生1～3d乳鼠脑组织,体外培养脑细胞,待细胞传代至第3代用于实验.将细胞分为两组:空白对照组细胞正常培养,不予任何处理;缺氧/复氧组以99.9％氮气培养细胞60 min(缺氧),开放瓶口复氧120 min模拟I/R模型.利用小干扰RNA (siRNA)沉默HMGB1基因(将siRNA和转染试剂Lipofectamine 2000混合物梯度转染至细胞中)作为HMGB 1-siRNA转染组,并设空白对照组(未经任何处理)和阴性对照组(转染对照siRNA).采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞中HMGB1和ERS相关分子的mRNA及蛋白表达.结果 ①缺氧/复氧组细胞内HMGB1和ERS相关分子葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶12(caspase-12)的mRNA及蛋白表达均较空白对照组明显升高(以空白对照组数值为基数1,HMGB1 mRNA:3.19±0.48比1,t=2.183,P=0.008;GRP78 mRNA:2.07±0.33比1,t=3.292,P=0.016;CHOP mRNA:1.93±0.28比1,t=2.573,P=0.021;caspase-12 mRNA:2.42±0.42比1,t=2.261,P=0.027;HMGB1蛋白:2.28±0.36比1,t=2.042,P=0.009;GRP78蛋白:1.33±0.24比1,t=2.781,P=0.01

作者：赵菁；耿文静；翟博智；宋毅军

来源：中华危重病急救医学 2016 年 28卷 4期