目的 探讨微小RNA-1(miR-1)在高糖培养所致大鼠心肌纤维化中的作用途径.方法 取1~3日龄SD大鼠心尖组织培养原代心肌成纤维细胞,传代至3~4代细胞后被随机分为正常糖空病毒组(CON+ Lv-Vehicle组)、正常糖miR-1沉默组(CON+Lv-miR1组)、高糖空病毒组(HG+Lv-Vehicle组)、高糖miR-1沉默组(HG+Lv-miR1组)、高糖空病毒抑制剂组(HG+Lv-Vehicle+CC组)、高糖miR-1沉默抑制剂组(HG+Lv-miR1+CC组).将细胞分别置于葡萄糖5.5 mmol/L(正常糖)和25.0 mmol/L(高糖)的DMEM培养基中,接种含miR-1沉默序列的慢病毒载体或慢病毒;抑制剂组于取样前12 h加入20 μmol/L腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂Compound C.采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测磷酸化AMPK(p-AMPK)、胶原蛋白Ⅰ和Ⅲ、基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)、自噬流相关蛋白〔微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)、死骨片重组蛋白1(p62/SQSTM1)〕的蛋白表达.结果 体外培养大鼠心肌成纤维细胞的纯度达97
作者：仇佳；王安；许映娜；乔世刚；安建中；李华；王琛
来源：中华危重病急救医学 2018 年 30卷 2期
