目的 探讨程序性死亡配体-1 (PD-L1)在肺微血管内皮细胞或肺上皮细胞的表达及其在小鼠间接急性肺损伤(i-ALI)模型中的作用及机制.方法 将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为两部分(均n=40),分别观察不同给药途径对PD-L1表达的影响.每部分小鼠按照随机数字表法分为假手术(Sham)组、i-ALI组、i-ALI+小干扰RNA (siRNA)随机序列对照组及i-ALI+含可特异性抑制PD-L1表达碱基对的siRNA (PD-L1siRNA)组,每组10只.采用失血性休克联合盲肠结扎穿孔术(CLP)“二次打击”诱导i-ALI模型;Sham组仅结扎双侧股动脉,不予置管及放血,且仅分离盲肠但不结扎穿孔.i-ALI+PD-L1 siRNA组于小鼠休克复苏2h后分别经尾静脉或气道内给予PD-L1 siRNA阻断肺微血管内皮细胞或肺上皮细胞PD-L1的表达;i-ALI+siRNA随机序列对照组给予无抑制PD-L1表达效应的siRNA随机序列;Sham组和i-ALI组给予100 μL磷酸盐缓冲液(PBS).CLP术后24 h处死小鼠,收集外周血、肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF),用流式细胞仪检测PD-L1蛋白表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血、肺组织以及BALF中的细胞因子和趋化因子水平,定量检测血浆和BALF中蛋白浓度及肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性,光镜下观察肺组织病理学改变.结果 ①与Sham组相比,i-ALI组肺微血管内皮细胞或肺上
作者:孙冰珂;李秀华;郑贵珍;董天操;李玉生;李红强;燕艳丽;白建文;许淑敏
来源:中华危重病急救医学 2019 年 31卷 1期