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目的:探讨解耦联蛋白2(UCP2)过表达是否通过抑制活性氧(ROS)产生、降低炎症反应,发挥脓毒症心肌保护作用。方法:将40只SD大鼠按随机数字表法分为假转染假手术组(Sham组)、假转染盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症组(CLP组)、单纯腺相关病毒(AAV)转染手术组(AAV组)和UCP2过表达手术组(UCP2组)4组,每组10只。UCP2组心肌注射UCP2腺相关病毒(AAV-UCP2;滴度1×10 12 v.g/mL,每个点10 μL,共60 μL),3周后进行CLP;AAV组心肌转染AAV病毒,3周后进行CLP。制模后24 h评价模型是否制备成功并取材,荧光显微镜下观察心肌组织冰冻切片AAV病毒转染效果,蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测心肌组织UCP2蛋白表达,二氢乙啶(DHE)染色检测心肌细胞ROS产生情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清心肌标志物和炎性细胞因子水平。 结果:CLP术后24 h大鼠表现为立毛、眼鼻口分泌物增多,甚至出现脓尿、稀便及呼吸困难等症状;开腹后发现盲肠呈紫黑色,周围肠腔有脓性渗出;冰冻切片后荧光显微镜下可见病毒转染成功(转染部位呈绿色荧光)。进一步Western blotting检测显示,CLP组UCP2表达较Sham组增加(UCP2/β-tubulin:1.53±0.06比1, P<0.01);与AAV组相比,UCP2组UCP

作者:耿争光;罗诗雨;李光素;陆钦菊;付豹;傅小云

来源:中华危重病急救医学 2020 年 32卷 11期

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作者:
耿争光;罗诗雨;李光素;陆钦菊;付豹;傅小云
来源:
中华危重病急救医学 2020 年 32卷 11期
标签:
脓毒症 心肌保护 解耦联蛋白2 盲肠结扎穿孔术 Sepsis Myocardial protection Uncoupling protein 2 Cecal ligation and perforation
目的:探讨解耦联蛋白2(UCP2)过表达是否通过抑制活性氧(ROS)产生、降低炎症反应,发挥脓毒症心肌保护作用。方法:将40只SD大鼠按随机数字表法分为假转染假手术组(Sham组)、假转染盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症组(CLP组)、单纯腺相关病毒(AAV)转染手术组(AAV组)和UCP2过表达手术组(UCP2组)4组,每组10只。UCP2组心肌注射UCP2腺相关病毒(AAV-UCP2;滴度1×10 12 v.g/mL,每个点10 μL,共60 μL),3周后进行CLP;AAV组心肌转染AAV病毒,3周后进行CLP。制模后24 h评价模型是否制备成功并取材,荧光显微镜下观察心肌组织冰冻切片AAV病毒转染效果,蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测心肌组织UCP2蛋白表达,二氢乙啶(DHE)染色检测心肌细胞ROS产生情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清心肌标志物和炎性细胞因子水平。 结果:CLP术后24 h大鼠表现为立毛、眼鼻口分泌物增多,甚至出现脓尿、稀便及呼吸困难等症状;开腹后发现盲肠呈紫黑色,周围肠腔有脓性渗出;冰冻切片后荧光显微镜下可见病毒转染成功(转染部位呈绿色荧光)。进一步Western blotting检测显示,CLP组UCP2表达较Sham组增加(UCP2/β-tubulin:1.53±0.06比1, P<0.01);与AAV组相比,UCP2组UCP