目的构建结核杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6基因测序质粒及真核表达重组质粒,为结核病的诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测打下基础.方法以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,用PCR法对基因ESAT-6进行扩增,将扩增的产物连接于测序载体pUCm-T上,经测序反应确定无误,再将PCR反应产物经酶切后,克隆于真核表达载体pcDNA3.1(+)上.结果构建了结核杆菌基因ESAT-6的重组测序质粒,并对其进行了测序.真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)-ESAT-6亦构建成功.结论结核杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6真核表达重组质粒的成功构建为结核病的诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测以及相应抗原、抗体的制备打下基础.
作者：蒋玉凤；张建军；钟森；史小玲；邓存良；王明勇
来源：中国现代医学杂志 2003 年 13卷 21期
