目的开发激肽释放酶基因工程产品,为开展基因治疗高血压奠定基础.方法提取人胰腺组织总RNA,逆转录后PCR扩增激肽释放酶cDNA.回收、补平后插入质粒KS,构建出中间载体KSKK,酶切鉴定后双向测序分析激肽释放酶基因序列.从KSKK中切出激肽释放酶原及激肽释放酶基因,插入真核表达载体PET-28b(+),经酶切鉴定后,进行核苷酸序列分析和融合蛋白表达.结果本实验克隆的激肽释放酶基因与GenBank报告的激肽释放酶基因相比,有一个碱基不同,同源性为99.8
作者:戴勇;彭武建;李体远;杜珙;孙文学;黄瑞芳
来源:中国现代医学杂志 2005 年 15卷 16期