目的 筛选肝癌细胞中与ezrin基因表达相关的微小RNA(miRNA),并分析其在肝癌浸润转移中的作用.方法 ①实时逆转录(RT)PCR技术和蛋白印迹法分别检测两对具有不同侵袭转移能力的肝癌细胞系HepG2和HepG2-X细胞及SF7721和SMMC-7721细胞中ezrin mRNA和蛋白的表达差异,选取其中ezrin mRNA和蛋白表达差异相对较大的1对细胞系(即SF7721和SMMC-7721细胞)用于以下实验.②用miRNA芯片筛选SF7721和SMMC-7721细胞中差异表达miRNA,然后用生物信息学工具[三大数据库,即TARGETSCAN(http://www.targetscan.org)、MICROCOSM(http://www.ebi.ac.Uk/enright-srv/microcosm/htdocs/targets/vS/)和PICTAR (http://www.pictar.mdc-berlin.de)数据库]预测并比对miRNA芯片的筛选结果,筛选出与ezrin基因表达相关的miRNA,并采用实时RT-PCR技术验证.将筛选出来的miRNA转染SF7721细胞,用蛋白印迹法和实时RT-PCR技术检测其对SF7721细胞中ezrin mBNA和蛋白表达的调控作用,以来做任何处理者为空白对照.结果 ①SF7721细胞中ezrin mRNA的表达水平是SMMC-7721细胞的(62.53±4.37)倍,HepG2-X细胞中ezrin mRNA的表达水平是HepG2细胞的(2.61±0.23)倍,两者分别比较,差异均有显著性(P＜0.01);蛋白印迹法检测显示,SF7721细胞中ezrin蛋白的表达强度

作者：刘碧英；李坚

来源：中国现代医学杂志 2013 年 23卷 36期