目的：通过氯化钴构建缺氧脐静脉内皮细胞模型，探讨白细胞介素-8（IL-8）对缺氧脐静脉内皮细胞存活、凋亡的影响及机制。<br> 方法：体外培养脐静脉内皮细胞加入不同浓度氯化钴或IL-8孵育，检测细胞存活率。正常或缺氧内皮细胞加入IL-8或同时加入IL-8抗体/蛋白激酶B（Akt）抑制剂LY294002孵育48 h，采用四唑盐比色法检测细胞存活率；用流式细胞术连接素V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭（Annexin V-FITC/ PI）双染标记法检测细胞凋亡；蛋白免疫印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、磷酸化Akt（pAkt）和磷酸化糖原合成酶激酶3βser9（pGSK-3βser9）蛋白表达。<br> 结果：低浓度氯化钴（50，100μmol/L）孵育人脐静脉内皮细胞株（HUVECs）12 h可促进细胞增殖（P<0.01）；而高浓度氯化钴（200，400μmol/L）孵育24 h和48 h则均明显减少内皮细胞存活。10、50和100 ng/ml的IL-8分别孵育内皮细胞48 h和72 h均可明显改善缺氧对脐静脉内皮细胞存活率的影响，细胞存活增加（P<0.01）。10 ng/ml的IL-8可显著抑制正常和缺氧细胞的凋亡和下调caspase-3水平，上调pAkt和pGSK-3βser9水平（P<0.01）；而LY294002或IL-8抗体均可拮抗IL-8的上述作用（P<0.01）。<br> 结论：IL-8可通过下调caspase-3水
作者：谢启应；杨天伦；孙泽琳；易军
来源：中国循环杂志 2015 年 12期
