目的:观察激活G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大的影响,并探讨其可能的机制.方法:2~3日龄乳鼠心肌细胞体外原代培养.利用串联质谱标签(TMT)蛋白质谱技术检测蛋白表达差异,并作相关生物信息学分析,筛查其可能的调节机制.机制研究分6组,空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+GPER1激活剂(G1)组、AngⅡ+G1+GPER1抑制剂(G15)组、AngⅡ+G1+ 细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂(U0126)组和AngⅡ+G1+丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)抑制剂 (MK2206)组,各组n=3.检测各组心肌细胞GPER1的表达,心房钠尿肽(ANP)和B型利钠肽(BNP)的mRNA水平,ERK、AKT蛋白的表达及其相互作用,以及对自噬相关蛋白胞浆型自噬标记轻链3(LC3II)和膜型自噬标记轻链3(LC3I) 的调控.流式细胞技术检测GPER1对细胞凋亡的影响.结果:AngⅡ诱导心肌细胞肥大呈浓度依赖性,ANP和BNP mRNA水平梯度升高(P<0.05).细胞免疫荧光染色显示,心肌细胞上存在GPER1蛋白表达.荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)结果显示,激活剂G1激活GPER1,并以浓度依赖方式抑制心肌细胞ANP和BNP mRNA水平(P<0.05);在AngⅡ+G1+G15组,心肌细胞ANP和BNP mRNA水平重新升高(P<0.05).蛋白免疫印迹法(Western-blot)结果显示,与空白对照组或AngⅡ组相比, AngⅡ+G1组p-ERK

作者：裴慧；王立启；王磊；王维；毕秀萍；才晓君；苏国海；赵卓

来源：中国循环杂志 2018 年 33卷 5期