目的 探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCM-SC)源外泌体对氧糖剥夺复氧人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)凋亡的抑制作用,阐明其可能的机制.方法 培养HUCMSC,将收集的细胞上清液使用超速离心法提取HUCMSC分泌的外泌体(HUCMSC-exosomes,HUCMSC-EXO)并对其进行鉴定,将HUVEC随机分为正常对照组、模型组(氧糖剥夺/复氧组)和分别添加不同浓度的HUCMSC-EXO(20 μg/ml、40 μg/ml、60μg/ml)处理组(在模型组的基础上加入HUCMSC-EXO).倒置相差显微镜形态学观察各组HUVEC细胞的表观变化,使用CCK8试剂测算各组HUVEC增殖抑制率,Western blot检测相关凋亡蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达水平.另设模型组、HUCMSC-EXO+模型组、抑制剂+模型组和HUCMSC-EXO+抑制剂+模型组,Western blot观察HUCMSC-EXO、抑制剂及两者共用对HUVEC细胞HIF-1α及Bax的表达水平的影响.结果 成功提取和鉴定HUCMSC-EXO,在倒置相差显微镜下,与正常对照组比较,模型组和不同浓度HUCMSC-EXO处理组的HUVEC体积缩小,变圆,连接疏散,生长状态较差;CCK8检测,HUCMSC-EXO处理组较模型组的细胞活力显著上升,差异有统计学意义(t=9.23,P<0.05),并与剂量呈正相关.Western blot检测,与对
作者:叶益超;李晓红;史新宇;张震文;刘晓银;陈健;张哲;武卫周;王景景;周红霞;王毅
来源:中华行为医学与脑科学杂志 2019 年 28卷 12期