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目的 探讨 let-7d microRNAs(miRNAs)抑制剂对海马神经元离体氧糖剥夺/复氧(OGD/R)细胞损伤中的凋亡抑制作用及机制.方法 培养小鼠海马神经元HT22细胞系,利用三气缺氧细胞培养箱及培养基缺糖方式建立 OGD/R细胞损伤模型,实时荧光定量 PCR检测海马神经元 OGD/R细胞损伤后 6,12,24 h let-7d mRNA表达.将细胞分为正常组、OGD/R+miRNA-NC组、OGD/R+let-7d mimics组和 OGD/R+let-7d inhibitor组,实时荧光定量 PCR检测各组细胞 let-7d和 NGF mRNA表达,CCK-8法检测各组细胞活性,Hoechst33342/PI双染法检测各组细胞凋亡率.结果 与正常组比较,海马神经元 OGD/R细胞损伤后 6,12,24 h let-7d表达显著降低(P<O.001).与正常组比较,OGD/R+miRNA-NC组 NGF mRNA表达和细胞凋亡率显著增高(P<O.001),let-7d mRNA表达和细胞活'性显著降低(P<O.001).与 OGD/R+miRNA-NC组比较,OGD/R+let-7d inhibitor组 let-7d mRNA表达和细胞凋亡率显著降低,NGF mRNA表达和细胞活性显著增高.而 OGD/R+let-7d mimics组作用与之相反(P<O.001).结论 let-7d inhibitor能够抑制 OGD/R诱导的海马神经元细胞凋亡,其机制可能与上调内源性保护因子 NGF表达有关.

作者:李中岩;李文媛;王莹;李雪花

来源:山西医科大学学报 2019 年 50卷 12期

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作者:
李中岩;李文媛;王莹;李雪花
来源:
山西医科大学学报 2019 年 50卷 12期
标签:
let-7d抑制剂 氧糖剥夺/复氧 海马神经元 细胞凋亡
目的 探讨 let-7d microRNAs(miRNAs)抑制剂对海马神经元离体氧糖剥夺/复氧(OGD/R)细胞损伤中的凋亡抑制作用及机制.方法 培养小鼠海马神经元HT22细胞系,利用三气缺氧细胞培养箱及培养基缺糖方式建立 OGD/R细胞损伤模型,实时荧光定量 PCR检测海马神经元 OGD/R细胞损伤后 6,12,24 h let-7d mRNA表达.将细胞分为正常组、OGD/R+miRNA-NC组、OGD/R+let-7d mimics组和 OGD/R+let-7d inhibitor组,实时荧光定量 PCR检测各组细胞 let-7d和 NGF mRNA表达,CCK-8法检测各组细胞活性,Hoechst33342/PI双染法检测各组细胞凋亡率.结果 与正常组比较,海马神经元 OGD/R细胞损伤后 6,12,24 h let-7d表达显著降低(P<O.001).与正常组比较,OGD/R+miRNA-NC组 NGF mRNA表达和细胞凋亡率显著增高(P<O.001),let-7d mRNA表达和细胞活'性显著降低(P<O.001).与 OGD/R+miRNA-NC组比较,OGD/R+let-7d inhibitor组 let-7d mRNA表达和细胞凋亡率显著降低,NGF mRNA表达和细胞活性显著增高.而 OGD/R+let-7d mimics组作用与之相反(P<O.001).结论 let-7d inhibitor能够抑制 OGD/R诱导的海马神经元细胞凋亡,其机制可能与上调内源性保护因子 NGF表达有关.