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目的 探讨七氟烷后处理对原代海马神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤、氧化应激及自噬的影响.方法 取(18±0.5)d孕鼠子宫内胎鼠海马组织,收集海马神经元进行培养,7d后培养的海马神经元随机分为3组:正常对照组(CON组)、氧糖剥夺/复氧组(OGD/R组)、七氟烷后处理组(OGD/R+SEVO组).CON组正常培养;OGD/R组:氧糖剥夺1.5 h,复氧复糖24 h,建立OGD/R损伤模型;OGD/R+SEVO组经氧糖剥夺后即刻予2.4%七氟烷后处理1 h,复氧复糖23 h.处理结束后,比色法检测各组乳酸脱氢酶(LDH)的活性,原位末端标记法(TUNEL)检测各组神经元凋亡变化,免疫荧光法检测各组神经元线粒体活性氧和微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达,Western blot检测丝氨酸/苏氨酸激酶(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)的表达.结果 与CON组比较,OGD/R组LDH释放增加(P<0.01),神经元凋亡增加,线粒体活性氧和自噬标志性蛋白LC3 B表达增加(P<0.01),PINK1蛋白和Parkin蛋白表达上调(P<0.001,P<0.05);与OGD/R组比较,OGD/R+SEVO组LDH释放减少(P<0.05),神经元凋亡减少,线粒体活性氧和自噬标志性蛋白LC3B表达降低(P<0.05),PINK1蛋白和Parkin蛋白表达下调(P<0.01,P<0.05).结论 七氟烷后处理可以通过减少OGD/R诱导的细胞过度自噬、减轻氧化应激、减少凋亡等途径来保护原代海马神经

作者:王佳楠;黄春霞;胡宪文

来源:安徽医科大学学报 2022 年 57卷 5期

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作者:
王佳楠;黄春霞;胡宪文
来源:
安徽医科大学学报 2022 年 57卷 5期
标签:
七氟烷 海马神经元 氧糖剥夺/复氧 自噬 凋亡 氧化应激
目的 探讨七氟烷后处理对原代海马神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤、氧化应激及自噬的影响.方法 取(18±0.5)d孕鼠子宫内胎鼠海马组织,收集海马神经元进行培养,7d后培养的海马神经元随机分为3组:正常对照组(CON组)、氧糖剥夺/复氧组(OGD/R组)、七氟烷后处理组(OGD/R+SEVO组).CON组正常培养;OGD/R组:氧糖剥夺1.5 h,复氧复糖24 h,建立OGD/R损伤模型;OGD/R+SEVO组经氧糖剥夺后即刻予2.4%七氟烷后处理1 h,复氧复糖23 h.处理结束后,比色法检测各组乳酸脱氢酶(LDH)的活性,原位末端标记法(TUNEL)检测各组神经元凋亡变化,免疫荧光法检测各组神经元线粒体活性氧和微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达,Western blot检测丝氨酸/苏氨酸激酶(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin)的表达.结果 与CON组比较,OGD/R组LDH释放增加(P<0.01),神经元凋亡增加,线粒体活性氧和自噬标志性蛋白LC3 B表达增加(P<0.01),PINK1蛋白和Parkin蛋白表达上调(P<0.001,P<0.05);与OGD/R组比较,OGD/R+SEVO组LDH释放减少(P<0.05),神经元凋亡减少,线粒体活性氧和自噬标志性蛋白LC3B表达降低(P<0.05),PINK1蛋白和Parkin蛋白表达下调(P<0.01,P<0.05).结论 七氟烷后处理可以通过减少OGD/R诱导的细胞过度自噬、减轻氧化应激、减少凋亡等途径来保护原代海马神经