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目的:探讨骨骼肌钝挫伤后线粒体自噬相关基因与自噬体变化的分子机制.方法:Wistar雄性大鼠64只,随机分为对照组、钝挫伤组(按照取材时间分为12h组、2d组、5d组、7d组、10d组、15d组、30 d组).采用重物下落装置导致右小腿内侧面(其皮下为腓肠肌中段)一次打击伤,建立急性骨骼肌钝挫伤模型,通过Western-Blotting和qRT-PCR技术分别检测钝挫伤后腓肠肌缺氧及自噬相关因子,包括低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、腺苷酸活化蛋白激酶α2亚基(AMPKα2)、Bcl-2腺病毒E1B19ku相关蛋白3(BNIP3)和Bcl-2家族的类NIP3蛋白(NIX)的蛋白和mRNA表达变化情况;透射电镜观察受损部位不同恢复时间的超微结构及自噬体形成情况.结果:(1)钝挫伤后,HIF-1α、AMPKα2蛋白表达在12 h、2 d达到峰值,至伤后10 d,HIF-1α表达均明显高于对照组(P<0.05);AMPKα2表达在伤后5 d仍显著高于对照组(P<0.05),至10 d回落至正常水平;BNIP3持续高表达至5 d后开始回落,但至10 d仍高于对照组;NIX表达峰值出现在伤后12 h、2 d,持续高表达至7 d.(2)钝挫伤后,相关基因表达水平,Hif-1α与Ampkα2 mRNA在2 d显著高于对照组(P<0.01),至5 d表达下降但仍高于对照组(P<0.05),随后回落至正常水平;Bnip3、Nix的mRNA变化情况与其蛋白表现基本一致.损伤后12 h在单个网孔视

作者:董贵俊;温含;张英祥;田雪文;李可峰;葛新发

来源:中国运动医学杂志 2019 年 38卷 5期

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作者:
董贵俊;温含;张英祥;田雪文;李可峰;葛新发
来源:
中国运动医学杂志 2019 年 38卷 5期
标签:
骨骼肌 钝挫伤 线粒体 自噬
目的:探讨骨骼肌钝挫伤后线粒体自噬相关基因与自噬体变化的分子机制.方法:Wistar雄性大鼠64只,随机分为对照组、钝挫伤组(按照取材时间分为12h组、2d组、5d组、7d组、10d组、15d组、30 d组).采用重物下落装置导致右小腿内侧面(其皮下为腓肠肌中段)一次打击伤,建立急性骨骼肌钝挫伤模型,通过Western-Blotting和qRT-PCR技术分别检测钝挫伤后腓肠肌缺氧及自噬相关因子,包括低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、腺苷酸活化蛋白激酶α2亚基(AMPKα2)、Bcl-2腺病毒E1B19ku相关蛋白3(BNIP3)和Bcl-2家族的类NIP3蛋白(NIX)的蛋白和mRNA表达变化情况;透射电镜观察受损部位不同恢复时间的超微结构及自噬体形成情况.结果:(1)钝挫伤后,HIF-1α、AMPKα2蛋白表达在12 h、2 d达到峰值,至伤后10 d,HIF-1α表达均明显高于对照组(P<0.05);AMPKα2表达在伤后5 d仍显著高于对照组(P<0.05),至10 d回落至正常水平;BNIP3持续高表达至5 d后开始回落,但至10 d仍高于对照组;NIX表达峰值出现在伤后12 h、2 d,持续高表达至7 d.(2)钝挫伤后,相关基因表达水平,Hif-1α与Ampkα2 mRNA在2 d显著高于对照组(P<0.01),至5 d表达下降但仍高于对照组(P<0.05),随后回落至正常水平;Bnip3、Nix的mRNA变化情况与其蛋白表现基本一致.损伤后12 h在单个网孔视