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目的 构建单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus Ⅰ,HSV-Ⅰ)SM44株截短塘蛋白B基因序列,为研制联合基因疫苗奠定基础,用于角膜炎的防治.方法 利用聚合酶链反应(polymerase chain response,PCR)技术从感染HSV-Ⅰ SM44株的vero细胞中扩增出HSV-gBt编码基因,经双酶切鉴定后将目的 基因定向插入真核表达质粒pcDNA3,载体中,构建出重组真核表达质粒pcDNA3-gBt,并对其进行酶切分析和测序鉴定.结果 对peDNA3-gBt双酶切后,电泳可见目的 基因(1.5 kb)和线性质粒pcDNA3(5.4 kb)两条带;测序结果表明,克隆基因插入方向正确,与基因库中登录的HSV-1 F株gB基因序列比较,同源性达99.5

作者:冯非;贺冰;孟祥俊;李光源

来源:中国眼耳鼻喉科杂志 2009 年 9卷 1期

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作者:
冯非;贺冰;孟祥俊;李光源
来源:
中国眼耳鼻喉科杂志 2009 年 9卷 1期
标签:
单纯疱疹病毒属 角膜炎 糖蛋白类
目的 构建单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus Ⅰ,HSV-Ⅰ)SM44株截短塘蛋白B基因序列,为研制联合基因疫苗奠定基础,用于角膜炎的防治.方法 利用聚合酶链反应(polymerase chain response,PCR)技术从感染HSV-Ⅰ SM44株的vero细胞中扩增出HSV-gBt编码基因,经双酶切鉴定后将目的 基因定向插入真核表达质粒pcDNA3,载体中,构建出重组真核表达质粒pcDNA3-gBt,并对其进行酶切分析和测序鉴定.结果 对peDNA3-gBt双酶切后,电泳可见目的 基因(1.5 kb)和线性质粒pcDNA3(5.4 kb)两条带;测序结果表明,克隆基因插入方向正确,与基因库中登录的HSV-1 F株gB基因序列比较,同源性达99.5