目的:研究肌细胞增强因子2D(MEF2D)影响肝癌细胞PLC对索拉菲尼耐药的作用机制.方法:建立索拉菲尼肝癌耐药细胞株(PLC-DR3),以过表达Ad-MEF2D载体感染PLC (PLC-AdMEF2D),CCK-8法检测索拉菲尼处理后PLC、PLC-DR3、PLC-AdMEF2D增殖能力,并计算索拉菲尼对各细胞的半数抑制浓度(IC50).采用Western blot法检测PLC、PLC-DR3中MEF2D、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)的表达和PLC-AdMEF2D细胞中MEF2D、ERK、p-ERK、促分裂原活化蛋白激酶(MEK)、磷酸化MEK(p-MEK)、快速发育生长因子同源蛋白4(SPRY4)的表达.采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测PLC、PLC-AdMEF2D中MEF2D mRNA和SPRY4 mRNA的表达.结果:索拉菲尼对PLC、PLC-DR3、PLC-AdMEF2D的IC50分别为(8.23±0.06)、(21.80±0.06)、(19.46±0.063) μmol/L.与PLC比较,PLC-DR3、PLC-AdMEF2D的IC50明显升高(P＜0.001);PLC-DR3中总ERK表达量基本不变,MEF2D、p-ERK的蛋白表达明显增强(P＜0.001);PLC-AdMEF2D中总ERK、MEK表达量基本不变,p-ERK和p-MEK蛋白表达增强(P＜0.01),SPRY4蛋白表达明显减弱(P＜0.001),SPRY4 mRNA表达水平明显减弱(P＜0.001).结论:MEF2D可能通过抑制SPRY4的表达,激活RAS/ERK通路,从而促进肝癌细胞对索拉菲尼耐药.

作者：马清霞；王园园；马海龙；李培宇；杨月成；杨志宏；刘佳；姜国辉

来源：中国药房 2018 年 29卷 17期