目的 探讨百草枯(PQ)诱导人肺Ⅱ型上皮样A549细胞凋亡过程中线粒体凋亡通路的发生机制.方法 体外培养A549细胞,对照组加入RPMI 1640培养液,实验组加入不同浓度的PQ(50、100、150和200 μmol/L),2组细胞继续培养24和48 h.MTT法检测细胞活性;Hoechst 33258染色法观察细胞核的形态;流式细胞术检测细胞凋亡率以及线粒体膜电位;分光光度法检测caspase-3和caspase-9的活化程度;Western blotting检测线粒体凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-xL、Bax和Bak的表达.结果 MTT结果显示,PQ对A549细胞具有显著的生长抑制作用.Hoechst染色显示,不同浓度的PQ作用于A549细胞24和48 h后,可发现细胞凋亡的特征性改变,如细胞核固缩、核碎裂、凋亡小体形成,并且细胞的凋亡程度随着PQ浓度的增大和作用时间的延长而加重.细胞凋亡率升高也证实了这一结果.线粒体膜电位出现不同程度的降低;caspase-3和caspase-9活性不同程度的增加;抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL的表达量降低;促凋亡蛋白Bax、Bak的表达量升高.以上结果均呈时间与浓度依赖性.结论 PQ通过激活线粒体凋亡通路诱导A549细胞凋亡.
作者：孙大壮；王蕊；宋春青；许勇民；董雪松
来源：中国医科大学学报 2017 年 46卷 11期
