目的 探讨MAPK家族中P38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路在百革枯(Paraquat,PQ)诱导的肺泡上皮细胞上皮-间质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用.方法 在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN)中加入不同浓度PQ(0、25、50、100 μmol/L)后共培养6、12、24h.倒置相差显微镜观察细胞形态学改变,划痕实验评估细胞迁移能力,免疫印迹法(Western blot)检测上皮及间质细胞表型蛋白表达(上皮细胞表型蛋白:E-cad、ZO-1,间质细胞表型蛋白:Vimentin、a-SMA)、MAPK信号通路关键蛋白的表达(P-p38 MAPK、P-Erk1/2、P-JNK),实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测成纤维细胞/肌成纤维细胞(MFB/FB)主要产物COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、Fn和EMT来源的成纤维细胞标志物FSP-1的基因表达.结果 100 μmol/L PQ分别处理6、12、24h,细胞由卵圆形或多边形的上皮细胞变成长梭形的间质细胞,细胞间连接消失,且时间越长形态学改变越明显.与对照组比较,50、100、200、300 μmol/L PQ处理24h的细胞存活率明显下降,200 μmol/L PQ作用于细胞的时间越长(6、12、24、36、48 h),细胞存活率越低;与对照组比较,50、100 μmol/L PQ诱导上皮细胞标记蛋白E-cad、ZO-1蛋白表达下调,且下调
作者:朱晨笛;郭慕真;蔡倩;李颖颖;武坷鑫;黄敏
来源:中华劳动卫生职业病杂志 2018 年 36卷 8期