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目的以内皮细胞产生NO的关键酶--eNOS(内皮一氧化氮合酶)为研究目标,探讨外源性内皮源性超极化因子EDHF(EETs)对内皮细胞合成NO的影响.方法在原代培养3~4代以内的牛主动脉内皮细胞中,分别加入不同浓度(50~200 nmol*L-1)的8,9-EET、11,12-EET、14,15-EET,作用1 h后用不同的方法收获细胞.用Western Blot以及Northern Blot方法检测EETs对eNOS基因表达的影响;同时通过检测L-[3H]-精氨酸转化为L-[3H]-瓜氨酸的量研究EETs对NOS活性的影响.结果显示8,9-EET、11,12-EET、14,15-EET均呈浓度依赖性地增加eNOS蛋白质的表达,并提高eNOS mRNA表达水平以及NOS酶活性.结论外源性EDHF对eNOS基因表达是一种正反馈调节作用,从而能够促进内皮细胞NO的产生,通过药物调节内皮表氧化酶进而促进eNOS基因表达可作为防治心血管疾病的新策略.

作者:林立;王红;陆再英;李宏伟;汪道文

来源:中国药理学通报 2003 年 19卷 9期

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作者:
林立;王红;陆再英;李宏伟;汪道文
来源:
中国药理学通报 2003 年 19卷 9期
标签:
内皮源性超极化因子 EETs 内皮一氧化氮合酶 内皮细胞
目的以内皮细胞产生NO的关键酶--eNOS(内皮一氧化氮合酶)为研究目标,探讨外源性内皮源性超极化因子EDHF(EETs)对内皮细胞合成NO的影响.方法在原代培养3~4代以内的牛主动脉内皮细胞中,分别加入不同浓度(50~200 nmol*L-1)的8,9-EET、11,12-EET、14,15-EET,作用1 h后用不同的方法收获细胞.用Western Blot以及Northern Blot方法检测EETs对eNOS基因表达的影响;同时通过检测L-[3H]-精氨酸转化为L-[3H]-瓜氨酸的量研究EETs对NOS活性的影响.结果显示8,9-EET、11,12-EET、14,15-EET均呈浓度依赖性地增加eNOS蛋白质的表达,并提高eNOS mRNA表达水平以及NOS酶活性.结论外源性EDHF对eNOS基因表达是一种正反馈调节作用,从而能够促进内皮细胞NO的产生,通过药物调节内皮表氧化酶进而促进eNOS基因表达可作为防治心血管疾病的新策略.