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目的 研究2,3-吲哚醌(2,3-dioxoindoline, isatin,ISA)在体外对人神经母瘤细胞(SH-SY5Y) 分泌肿瘤凋亡抑制因子survivin的影响,并探讨其作用机制.方法 体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞,将SH-SY5Y细胞随机分为对照组和ISA不同浓度(100、200、400 μmol*L-1)处理组,采用荧光染色、DNA Ladder分析细胞凋亡,RT-PCR及Western blot等方法 检测不同浓度ISA作用后survivin及p53在mRNA和蛋白水平的变化,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测Caspase-3蛋白水平的变化.结果 ISA(100、200、400 μmol*L-1)作用SH-SY5Y细胞48 h后,在荧光显微镜下观察到400 μmol*L-1 ISA组细胞出现典型的凋亡形态学改变:核染色质聚集、核碎裂、胞质浓缩;琼脂糖凝胶电泳显示400 μmol*L-1 ISA处理组细胞出现明显的梯形条带;RT-PCR及Western blot显示:随着ISA药物浓度的增加,survivin mRNA及蛋白表达逐渐减少(P<0.05),野生型p53 mRNA及蛋白表达水平逐渐增加,各用药组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),并呈现浓度依赖关系;FCM结果显示随着ISA药物浓度的增加,活化Caspase-3的表达率分别为18.38

作者:周立冬;侯琳;宋金莲;葛银林;岳旺;欧阳奇琦

来源:中国药理学通报 2009 年 25卷 6期

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作者:
周立冬;侯琳;宋金莲;葛银林;岳旺;欧阳奇琦
来源:
中国药理学通报 2009 年 25卷 6期
标签:
2,3-吲哚醌 凋亡 SH-SY5Y细胞 survivin p53 Caspase-3
目的 研究2,3-吲哚醌(2,3-dioxoindoline, isatin,ISA)在体外对人神经母瘤细胞(SH-SY5Y) 分泌肿瘤凋亡抑制因子survivin的影响,并探讨其作用机制.方法 体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞,将SH-SY5Y细胞随机分为对照组和ISA不同浓度(100、200、400 μmol*L-1)处理组,采用荧光染色、DNA Ladder分析细胞凋亡,RT-PCR及Western blot等方法 检测不同浓度ISA作用后survivin及p53在mRNA和蛋白水平的变化,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测Caspase-3蛋白水平的变化.结果 ISA(100、200、400 μmol*L-1)作用SH-SY5Y细胞48 h后,在荧光显微镜下观察到400 μmol*L-1 ISA组细胞出现典型的凋亡形态学改变:核染色质聚集、核碎裂、胞质浓缩;琼脂糖凝胶电泳显示400 μmol*L-1 ISA处理组细胞出现明显的梯形条带;RT-PCR及Western blot显示:随着ISA药物浓度的增加,survivin mRNA及蛋白表达逐渐减少(P<0.05),野生型p53 mRNA及蛋白表达水平逐渐增加,各用药组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),并呈现浓度依赖关系;FCM结果显示随着ISA药物浓度的增加,活化Caspase-3的表达率分别为18.38