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目的 观察过表达硫酯酶超家族成员4(thioesterase superfamily member 4,THEM4)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞胶原分泌的影响.方法 体外培养人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubular epithelial cell,HKC),将细胞随机分为正常对照组(5.5 mmol·L-1 normal glucose,Con-trol)、高糖组(30 mmol·L-1 high glucose,HG)、高糖+pYr-ads-4-THEM4质粒转染组(HG+THEM4)、高糖+pYr-ad-shuttle-4空质粒对照组(HG+V).后3组经高糖刺激48 h后终止培养,Western blot检测THEM4、phospho-Akt(Ser 473)、TGF-β1、α-SMA的表达;免疫细胞荧光检测THEM4蛋白表达和定位;ELISA方法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原(col-lagenⅠ,ColⅠ)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,ColⅢ)分泌情况.结果 高糖刺激可导致人肾小管上皮细胞内THEM4表达降低,phospho-Akt(Ser 473)、TGF-β1、α-SMA的表达增强及ColⅠ、ColⅢ分泌;过表达THEM4能够逆转高糖刺激所导致人肾小管上皮细胞phospho-Akt(Ser 473)蛋白的活化,下调 α-SMA、TGF-β1表达,抑制ColⅠ、ColⅢ的分泌.结论 过表达THEM4能够降低高糖诱导的胶原分泌,可能是通过抑制phospho-Akt(Ser 473)蛋白的活化,下调 α-SMA、TGF-β1表达而实现的.

作者:陈宁;郝军;朱桂云;安晓颖;康丽菲;李晓霞;杨永辉

来源:中国药理学通报 2017 年 33卷 12期

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作者:
陈宁;郝军;朱桂云;安晓颖;康丽菲;李晓霞;杨永辉
来源:
中国药理学通报 2017 年 33卷 12期
标签:
硫酯酶超家族成员4 PI3K/Akt 高糖 人肾小管上皮细胞 转化生长因子β1 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 thioesterase superfamily member 4 PI3K/ Akt high glucose human renal tubular cells TGF-β1 collagen Ⅰ collagen Ⅲ
目的 观察过表达硫酯酶超家族成员4(thioesterase superfamily member 4,THEM4)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞胶原分泌的影响.方法 体外培养人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubular epithelial cell,HKC),将细胞随机分为正常对照组(5.5 mmol·L-1 normal glucose,Con-trol)、高糖组(30 mmol·L-1 high glucose,HG)、高糖+pYr-ads-4-THEM4质粒转染组(HG+THEM4)、高糖+pYr-ad-shuttle-4空质粒对照组(HG+V).后3组经高糖刺激48 h后终止培养,Western blot检测THEM4、phospho-Akt(Ser 473)、TGF-β1、α-SMA的表达;免疫细胞荧光检测THEM4蛋白表达和定位;ELISA方法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原(col-lagenⅠ,ColⅠ)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,ColⅢ)分泌情况.结果 高糖刺激可导致人肾小管上皮细胞内THEM4表达降低,phospho-Akt(Ser 473)、TGF-β1、α-SMA的表达增强及ColⅠ、ColⅢ分泌;过表达THEM4能够逆转高糖刺激所导致人肾小管上皮细胞phospho-Akt(Ser 473)蛋白的活化,下调 α-SMA、TGF-β1表达,抑制ColⅠ、ColⅢ的分泌.结论 过表达THEM4能够降低高糖诱导的胶原分泌,可能是通过抑制phospho-Akt(Ser 473)蛋白的活化,下调 α-SMA、TGF-β1表达而实现的.