目的 探究体外转染克老素(Klotho,KL)基因对地塞米松(dexamethason,DEX)诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响.方法 用携带KL基因的重组腺病毒(Ad-KL)及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)感染细胞,并建立DEX诱导凋亡的细胞模型.运用荧光倒置显微镜观察重组腺病毒的转染效果,qPCR 与 Western blot 法分析 KL mRNA和蛋白表达情况;CCK-8法检测不同浓度DEX作用于MC3T3-E1细胞后的存活率及各研究组细胞的生存情况;流式细胞仪分析各研究组细胞的凋亡率;qPCR 与 Western blot分析凋亡标志物的 mRNA、蛋白表达;免疫荧光分析caspase-9的荧光蛋白表达情况.结果 重组腺病毒成功感染MC3T3-E1成骨细胞,KL组和KL+DEX组的KL mRNA与蛋白表达量较非转染组明显升高.CCK-8法检测出DEX的适宜干预浓度为2.0 mmol·L-1.DEX组、GFP+DEX组较其余组细胞存活率明显降低、凋亡率明显增加,Bax、Bcl-2的mRNA与蛋白表达分别表现出增加和降低趋势;KL组细胞存活率、凋亡率,以及 Bcl-2、Bax mRNA 与蛋白表达较DEX组及KL+DEX组均明显改善.结论 大剂量DEX的运用能够诱发MC3T3-E1成骨细胞凋亡,上调KL表达具有抵抗DEX诱导成骨细胞凋亡的作用,提示上调KL表达可改善糖皮质激素诱导性骨质疏松,为大剂量使用糖皮质激素所致医源性骨质疏松的治
作者：黄倩；李宝善；梁霄；刘丹；马厚勋
来源：中国药理学通报 2018 年 34卷 4期
