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目的 探究染料木素(genistein,GEN)对脂多糖(li-popolysaccharide,LPS)活化的RAW264.7细胞凋亡的影响及其可能的药理学作用机制.方法 GEN预孵育RAW264.7细胞或慢病毒介导的肿瘤坏死因子 α 诱导蛋白8样分子2(tumor necrosis factor-α-induced protein 8-like 2,TIPE 2)过表达细胞2 h,再与LPS共孵育24 h,采用CCK 8试剂盒检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡水平,qRT-PCR检测TNF-α、IL-6、caspase-8、caspase-3和TIPE 2 mRNA,Western blot检测iNOS、COX-2、caspase-8、caspase-3、TIPE 2、Akt和p-Akt蛋白表达.结果 LPS促进RAW264.7细胞TNF-α、IL-6、iNOS、COX-2合成;GEN抑制LPS活化的RAW264.7细胞活力,凋亡细胞增多,并上调caspase-8、caspase-3、TIPE 2 mRNA及蛋白表达;TIPE 2过表达上调活化RAW264.7细胞caspase-8、caspase-3 mRNA及蛋白表达,减少Akt磷酸化,且与GEN具有协同作用.结论 GEN可能通过上调TIPE 2抑制Akt活性,激活外源性凋亡途径,促进LPS活化的RAW264.7细胞凋亡.

作者:刘素娟;丛丽;张勇;向丽萍;谢小林;柏萍娟;向雪萍;符晓华

来源:中国药理学通报 2020 年 36卷 1期

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刘素娟;丛丽;张勇;向丽萍;谢小林;柏萍娟;向雪萍;符晓华
来源:
中国药理学通报 2020 年 36卷 1期
标签:
染料木素 TIPE2 Akt RAW264.7细胞 凋亡 脂多糖
目的 探究染料木素(genistein,GEN)对脂多糖(li-popolysaccharide,LPS)活化的RAW264.7细胞凋亡的影响及其可能的药理学作用机制.方法 GEN预孵育RAW264.7细胞或慢病毒介导的肿瘤坏死因子 α 诱导蛋白8样分子2(tumor necrosis factor-α-induced protein 8-like 2,TIPE 2)过表达细胞2 h,再与LPS共孵育24 h,采用CCK 8试剂盒检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡水平,qRT-PCR检测TNF-α、IL-6、caspase-8、caspase-3和TIPE 2 mRNA,Western blot检测iNOS、COX-2、caspase-8、caspase-3、TIPE 2、Akt和p-Akt蛋白表达.结果 LPS促进RAW264.7细胞TNF-α、IL-6、iNOS、COX-2合成;GEN抑制LPS活化的RAW264.7细胞活力,凋亡细胞增多,并上调caspase-8、caspase-3、TIPE 2 mRNA及蛋白表达;TIPE 2过表达上调活化RAW264.7细胞caspase-8、caspase-3 mRNA及蛋白表达,减少Akt磷酸化,且与GEN具有协同作用.结论 GEN可能通过上调TIPE 2抑制Akt活性,激活外源性凋亡途径,促进LPS活化的RAW264.7细胞凋亡.