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目的 探究顺铂联合小檗碱(berberine,BBR)对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及抗肺癌机制.方法 MTT法分别检测不同浓度的BBR、BBR联合不同浓度的顺铂对A549细胞增殖的作用;设置溶剂组、顺铂组、小檗碱组和顺铂+小檗碱组,细胞集落实验检测细胞集落形成;流式细胞术实验检测细胞凋亡;Western blot 检测 Bcl-2、cleaved-caspase-3及γH2AX蛋白表达;免疫荧光实验检测 DNA 损伤;活性氧(reactive oxygen species,ROS)清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)预处理后,流式细胞术实验和Western blot分别检测ROS水平和Bcl-2、cleaved-caspase-3蛋白表达.结果 BBR及 BBR联合顺铂浓度依赖性抑制A549细胞生长(P<0.05);相对对照组和单药组,联合组抑制细胞集落形成,促进细胞凋亡,抑制Bcl-2和提高cleaved-caspase-3表达,诱导DNA损伤及提高ROS水平(P<0.05).联用NAC后,凋亡率降低,Bcl-2和cleaved-caspase-3表达分别提高和降低(P<0.05).结论 顺铂联合BBR抑制A549细胞生长并诱导细胞凋亡,其机制可能与调控DNA损伤和ROS介导Bcl-2和cleaved-caspase-3蛋白表达有关.

作者:毛娟娟;程伟松;杨亦德;金茜;汪佳兵

来源:中国药理学通报 2020 年 36卷 6期

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作者:
毛娟娟;程伟松;杨亦德;金茜;汪佳兵
来源:
中国药理学通报 2020 年 36卷 6期
标签:
顺铂 小檗碱 A549细胞 凋亡 DNA损伤 ROS
目的 探究顺铂联合小檗碱(berberine,BBR)对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及抗肺癌机制.方法 MTT法分别检测不同浓度的BBR、BBR联合不同浓度的顺铂对A549细胞增殖的作用;设置溶剂组、顺铂组、小檗碱组和顺铂+小檗碱组,细胞集落实验检测细胞集落形成;流式细胞术实验检测细胞凋亡;Western blot 检测 Bcl-2、cleaved-caspase-3及γH2AX蛋白表达;免疫荧光实验检测 DNA 损伤;活性氧(reactive oxygen species,ROS)清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)预处理后,流式细胞术实验和Western blot分别检测ROS水平和Bcl-2、cleaved-caspase-3蛋白表达.结果 BBR及 BBR联合顺铂浓度依赖性抑制A549细胞生长(P<0.05);相对对照组和单药组,联合组抑制细胞集落形成,促进细胞凋亡,抑制Bcl-2和提高cleaved-caspase-3表达,诱导DNA损伤及提高ROS水平(P<0.05).联用NAC后,凋亡率降低,Bcl-2和cleaved-caspase-3表达分别提高和降低(P<0.05).结论 顺铂联合BBR抑制A549细胞生长并诱导细胞凋亡,其机制可能与调控DNA损伤和ROS介导Bcl-2和cleaved-caspase-3蛋白表达有关.