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目的 探讨内质网应激途径在腺苷诱导食管癌EC109细胞凋亡中的作用.方法 腺苷2 mmol·L-1作用于EC109细胞24 ~72 h或腺苷0.5 ~4 mmol·L-1作用于EC109细胞36 h,MTT法观察腺苷对EC109细胞存活率的时效和量效关系;免疫荧光法检测葡萄糖调节蛋白78( GRP78),胱天蛋白酶4,胱天蛋白酶3,转录因子CHOP和核因子κB (NF-κB)的表达及亚细胞定位;原位末端转移酶标记技术检测细胞凋亡;Western蛋白印迹法检测内质网应激相关蛋白表达.结果 腺苷对EC109细胞生长具有明显的抑制作用.腺苷2 mmol·L-1与EC109细胞作用24,36,48和72 h,细胞存活率分别为(57.7±15.0)%,(56.5±11.1)%,(43.8±5.7)%和(28.8±4.1)%,呈时间依赖性下降(r=0.9192,P<0.01);腺苷0.5,1,2和4 mmol· L-1与EC109细胞作用36 h,随药物浓度增加,细胞存活率依次为(83.1±1 1.2)%,(67.9±6.7)%,(55.3±5.0)%和(45.4±5.4)%,呈浓度依赖性降低(r=0.8252,P<0.01).腺苷0.5 ~4mmol·L-1与EC109细胞作用36 h,细胞凋亡率分别为(15.5±1.1)%,(28.2±0.8)%,(40.1±2.2)%和(50.6±1.3)%,与对照组(2.1±0.3)%相比均明显增加(P<0.05).腺苷2 mmol· L-1与EC109细胞作用36 h,与正常对照组相比,GRP78、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶3和CHOP表达明显增强(P <

作者:韦碧柳;李国平;蒲泽锦;黄官友;冯家琳;叶艳清;吴灵飞

来源:中国药理学与毒理学杂志 2011 年 25卷 6期

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韦碧柳;李国平;蒲泽锦;黄官友;冯家琳;叶艳清;吴灵飞
来源:
中国药理学与毒理学杂志 2011 年 25卷 6期
标签:
腺苷 细胞凋亡 内质网 应激 EC109细胞
目的 探讨内质网应激途径在腺苷诱导食管癌EC109细胞凋亡中的作用.方法 腺苷2 mmol·L-1作用于EC109细胞24 ~72 h或腺苷0.5 ~4 mmol·L-1作用于EC109细胞36 h,MTT法观察腺苷对EC109细胞存活率的时效和量效关系;免疫荧光法检测葡萄糖调节蛋白78( GRP78),胱天蛋白酶4,胱天蛋白酶3,转录因子CHOP和核因子κB (NF-κB)的表达及亚细胞定位;原位末端转移酶标记技术检测细胞凋亡;Western蛋白印迹法检测内质网应激相关蛋白表达.结果 腺苷对EC109细胞生长具有明显的抑制作用.腺苷2 mmol·L-1与EC109细胞作用24,36,48和72 h,细胞存活率分别为(57.7±15.0)%,(56.5±11.1)%,(43.8±5.7)%和(28.8±4.1)%,呈时间依赖性下降(r=0.9192,P<0.01);腺苷0.5,1,2和4 mmol· L-1与EC109细胞作用36 h,随药物浓度增加,细胞存活率依次为(83.1±1 1.2)%,(67.9±6.7)%,(55.3±5.0)%和(45.4±5.4)%,呈浓度依赖性降低(r=0.8252,P<0.01).腺苷0.5 ~4mmol·L-1与EC109细胞作用36 h,细胞凋亡率分别为(15.5±1.1)%,(28.2±0.8)%,(40.1±2.2)%和(50.6±1.3)%,与对照组(2.1±0.3)%相比均明显增加(P<0.05).腺苷2 mmol· L-1与EC109细胞作用36 h,与正常对照组相比,GRP78、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶3和CHOP表达明显增强(P <