目的 探讨GNF-5837修饰改造而合成的神经生长因子受体酪氨酸激酶A(TrkA)抑制剂B-1对胶质瘤U251细胞存活和凋亡的影响,为恶性胶质瘤治疗提供新的思路.方法B-1和GNF-5837 1.0×10-11～1.0×103 mol·L-1分别与TrkA激酶作用1h,ADP-GloTM激酶检测法测定TrkA活性;MTT法检测胶质瘤U251细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存活率;直接计数法检测胶质瘤U251细胞集落形成;流式细胞仪检测胶质瘤U251细胞凋亡率;Western蛋白印迹法检测BAD、BCL-2和胱天蛋白酶原3蛋白表达水平.结果 B-1和GNF-5837对TrkA活性的抑制作用相近,IC50值分别为4.7±1.0和(4.3±1.7)nmol·L-1;B-1可浓度依赖性抑制胶质瘤U251细胞的存活(r=0.968,P＜0.01),14 μmol·L-1时存活率降到50％;且B-1对HUVEC的IC50约为31 μmol· L-1,高于GNF-5837的IC50 13 μmol· L-1;B-1浓度依赖性抑制U251细胞集落形成能力(r=0.959,P＜0.05);与细胞对照组相比,B-1 10～40 μmol· L-1作用72 h后U251细胞的凋亡率升高(P＜0.01);U251细胞内促凋亡蛋白BAD水平显著上升(P＜0.01),而抗凋亡蛋白BCL-2和胱天蛋白酶原3表达水平降低(P＜0.01).结论 B-1能抑制胶质瘤U251细胞存活,其机制与B-1通过抑制Trk活性及下游信号通路,降低抗凋亡蛋白水平的同时增加促凋亡蛋白水平,最终诱导

作者：杨媛媛；王康敏；张士坤；宋锦文；檀英霞；李素波；高红伟；季守平；宫锋

来源：中国药理学与毒理学杂志 2016 年 30卷 8期