目的 研究淫羊藿苷(ICA)靶向Nod样受体家族蛋白3(NLRP3)炎症小体抑制BV2小胶质细胞炎症反应的作用机制.方法 用细菌脂多糖(LPS)+干扰素γ(IFN-γ)诱导小鼠BV2小胶质细胞,构建拟神经炎症反应的小胶质细胞模型.BV2细胞用DMEM高糖培养基培养,分为细胞对照组、ICA 10μmol·L-1组、模型组及模型+ICA 5,10和20μmol·L-1组.细胞对照和模型组加入DMEM高糖培养基培,ICA组加入ICA 10μmol·L-1,模型+ICA组分别加入相应浓度的ICA,孵育24 h;随后模型和模型+ICA组加入LPS 100μg·L-1和IFN-γ20μg·L-1,细胞对照和ICA组用等体积培养基代替,孵育18 h;最后模型+ICA组加入相应浓度的ICA,其他各组加入等体积培养基,继续孵育24 h.用Luminex法检测细胞上清中白细胞介素3(IL-3)、IL-5、IL-17和单核/巨噬细胞趋化因子11(CCL11)含量;用细胞免疫荧光染色法检测CD16/CD32(M1型小胶质细胞标志物)阳性和D206(M2型小胶质细胞标志物)阳性细胞百分比;Western印迹法检测细胞NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶1和胱天蛋白酶原1蛋白表达.结果 ①Luminex法检测结果显示,与细胞对照组相比,细胞+ICA组细胞上清中IL-3,IL-5,IL-17和CCL11水平无明显变化,模型组均显著升高(P<0.01).与模型组相比,模型+ICA 20μmol·L-1组上述细胞因
作者:郑层层;杨翠翠;郜丹;郝晋萍;张兰;胡朝英
来源:中国药理学与毒理学杂志 2022 年 36卷 4期