目的 探索经载体介导的RNA干扰抑制人NADH-细胞色素b5还原酶(b5R)基因表达的可行性.方法 应用网络在线软件设计并合成两条针对b5R mRNA的RNA干扰的DNA模板片段,分别将其克隆至经过改建、带有neo基因的pSilencer1.0-U6载体上,构建成siRNA真核表达载体;脂质体转染法将上述重组质粒转入人肺成纤维细胞和BEL-7402肝癌细胞株.通过半定量RT-PCR和荧光定量RT-PCR分析,检测所构建的重组siRNA真核表达载体对b5R基因表达的干扰效应.结果 获得两个能在细胞内生成靶向b5R基因siRNA的重组栽体pSib5R-1和pSibSR-2;其中psib5R-2时成纤维细胞b5R mRNA的抑制率达81.7
作者：庄岳鹏；王水良；兰风华
来源：中国优生与遗传杂志 2008 年 16卷 3期
