目的 研究在暴发性肝衰竭小鼠中肠道紧密连接蛋白claudin-1表达的改变以及与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系.方法 采用脂多糖(LPS,10 μg/kg)联合D氨基半乳糖(D-GalN,800mg/kg)腹腔注射制作小鼠暴发性肝衰竭模型.同时分别腹腔注射脂多糖(10 μg/kg)、D氨基半乳糖(800 mg/kg)、生理盐水(2ml/kg)设立各对照组.肝衰竭小鼠给致衰竭药物前尾静脉注射抗TNF-αIgG抗体(100 μg/只)设立TNF-α IgG抗体组.分别在肝衰竭组小鼠给药2、6、9、12、24 h后,各对照组及TNF-α IgG抗体组给药9h后将小鼠处死,取材大肠组织.应用免疫组织化学技术、Western blot及实时定量PCR检测暴发性肝衰竭进程中,小鼠大肠上皮细胞间紧密连接蛋白claudin-1的定位、表达及mRNA的变化.结果 免疫组化发现claudin-1蛋白主要沿小鼠大肠黏膜上皮细胞膜的顶端和隐窝处呈线状分布.肝衰竭组小鼠给药9h后,claudin-1阳性染色明显减少.Western blot显示和生理盐水对照组相比,肝衰竭组小鼠给药6、9h后,claudin-1蛋白表达明显减少(6 h:0.86±0.0208 vs1.0,P＜0.05;9 h:0.6633±0.0328 vs 1.0,P＜0.01).实时定量PCR显示肝衰竭组小鼠给药6、9、12 h后claudin-1 mRNA表达明显减少(6 h:0.3067 ±0.1291 vs 1.0,P＜0.05;9 h:0.2233 ±0.1155 vs1.0,P＜0.01;12

作者：张树君；李国珍；汪照函；付金龙；刘沛

来源：中国医师杂志 2013 年 15卷 4期