目的 利用超小超顺磁性氧化铁(USPIO)标记带有红色荧光蛋白(RFP)的F344大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),探索双模态成像示踪标记干细胞示踪的可行性.方法 使用含USPIO(40 μg Fe/ml)的培养基与BMSCs/RFP共孵育培养24 h,标记后行普鲁士蓝染色、透射电镜检查及台盼蓝染色验证标记的有效性和安全性.实验组(n=8)通过心肌局部注射方式将双标干细胞移植至急性心肌梗死F344大鼠的梗死心肌周围,术后不同时间点(1d、1周、2周和4周)行磁共振成像和荧光成像,对双标干细胞进行示踪并比较信号强度变化；对照组(n=2)不注射细胞,行磁共振和光学成像.4周后将大鼠麻醉处死后取心脏病理行HE染色、普鲁士蓝染色和荧光成像,观察双标干细胞在心肌内的分布.结果 共孵育培养24 h的方式可以有效、安全地构建USPIO-RFP双标BMSCs干细胞,普鲁士蓝染色显示USPIO标记阳性率为99％,透射电镜提示USPIO颗粒主要位于胞质内溶酶体中.台盼蓝染色显示标记组和阴性对照组活细胞率差异无统计学意义(95.7％比96.3％,P＞0.05).心肌局部注射双标干细胞的实验组8只大鼠,磁共振成像在术后4周内均能观察到注射区域信号强度降低,并且信号强度随时间的延长变化无统计学意义(P=0.66)；在体荧光成像未能检测到荧光信号,而离体荧光成像检测到心脏表面细胞注射
作者：曹剑；王怡宁；石新琳；马国涛；孔令燕；薛华丹；雷晶；何泳蓝；金征宇
来源：中国医学科学院学报 2012 年 34卷 5期
