目的 探讨E2F1基因过表达对人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT116/L多药耐药性的影响及作用机制.方法 HCT116/L细胞分为HCT116/L+E2F1组﹑HCT116/L+NC组和HCT116/L组,HCT116/L+E2F1组和HCT116/L+NC组分别转染E2F1过表达重组慢病毒载体(pCMA-E2F1-HA)及其阴性对照慢病毒载体(pCMA-HA).Western blot检测E2F1蛋白的表达水平;MTT法检测各组对化疗药物(阿霉素、5-FU和顺铂)的敏感性;流式细胞仪检测各组细胞内阿霉素的泵出率和细胞凋亡情况;细胞划痕实验检测细胞迁移情况.Western blot进一步检测耐药相关基因MDR1蛋白的表达水平.结果 HCT116/L+E2F1组的E2F1蛋白表达水平明显高于HCT116/L+NC组和HCT116/L组(P<0.05);HCT116/L+E2F1组对阿霉素、5-FU和顺铂的IC50值分别为(1.61±0.21)μg/mL﹑(5.22±0.12)μg/mL﹑(3.52±0.15)μg/mL,高于HCT116/L+NC组的(0.61±0.11)μg/mL﹑(3.93±0.54)μg/mL﹑(2.31±0.45)μg/mL和HCT116/L组的(0.69±0.13)μg/mL﹑(4.19±0.51)μg/mL﹑(2.51±0.42)μg/mL(P<0.05);HCT116/L+E2F1组阿霉素的泵出率为(22.51±0.12)%,亦高于HCT116/L+NC组的(10.92±0.09)%和HCT116/L组的(8.45±0.11)%(P<0.05);HCT116/L+E2F1组细胞凋亡率为(6.42±0.52)%,低于HCT116/L+NC组的(12.81±0.69)%和HC
作者:严林海;金钦文;覃宇周;陈建思;钟华戈;唐卫中
来源:中国癌症防治杂志 2019 年 11卷 1期