目的 研究miR-302b靶向调控转录因子(E2F1)对结肠癌细胞增殖和凋亡影响.方法 以结肠癌细胞SW620作为体外实验对象,转染miR-302b mimics、mimics control,Realtime PCR方法测定过表达效果,MTT方法测定细胞增殖变化,克隆形成实验测定细胞克隆能力,流式细胞术测定细胞凋亡变化,免疫印迹测定细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平.靶基因预测软件预测E2F1可能是miR-302b的靶基因,构建荧光素酶报告载体鉴定.将miR-302b mimics和pc DNA3.1-E2F1共转染至SW620细胞中,用上述方法测定细胞增殖、克隆、凋亡和Cleaved Caspase-3、E2F1蛋白表达水平.结果 SW620细胞转染miR-302b mimics后,miR-302b表达增多,细胞增殖、克隆形成能力降低,细胞凋亡增多,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高.野生型E2F1荧光素酶报告载体与miR-302b mimics共转染后细胞荧光素酶活性降低.与单纯转染miR-302b mimics的细胞比较,miR-302bmimics和pc DNA3.1-E2F1共转染可以明显提高SW620细胞增殖、克隆能力和E2F1蛋白表达水平,并减少细胞凋亡和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平.结论 miR-302b靶向调控E2F1抑制结肠癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.
作者：朱素华；王雷；张志明
来源：中华生物医学工程杂志 2019 年 25卷 1期
