目的 对肺炎链球菌表面蛋白C (PspC)进行全基因合成、重组表达、纯化制备和鉴定.方法 根据GenBank中PspC的基因序列和氨基酸序列,通过密码子优化和全基因合成的方式获得目的蛋白基因,构建无标签、高效重组表达菌株,建立重组蛋白的纯化制备方法,并进行抗原鉴定及免疫原性检测分析.结果 人工合成的PspC基因序列经鉴定与预期一致,目的蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量在30%以上,经两步纯化后纯度达到95%.重组蛋白能与肺炎链球菌阳性血清产生特异性抗原抗体反应,免疫小鼠后可诱导产生较高水平的蛋白特异性抗体.结论 获得了重组肺炎链球菌蛋白PspC,其具有与天然抗原相似的抗原性和免疫原性,为今后开展疫苗研制、载体蛋白应用等研究奠定基础.
作者:谭亚军;王丽婵;卫辰;张华捷;侯启明;张庶民;马霄
来源:中国医药生物技术 2017 年 12卷 5期