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目的 构建白念珠菌CaCSC1基因的基因缺失株,并初步探究它的功能.方法 设计长引物,通过PCR直接扩增出带有SAT1 flipper的CaCSC1基因敲除盒,转化到野生型白念珠菌菌株CAI4,并通过PCR鉴定出基因型正确的转化子,得到CaCSC1的基因缺失株.最后,通过倍比稀释的方法进行表型筛选.结果 成功得到CaCSC1基因的缺失菌株.基因缺失菌株对酮康唑(Ketoconazole)敏感,对Zn2+、Mn2+和荧光增白剂(Calcofluor white)表现出耐受性.结论 CaCsc1蛋白参与对锌离子和锰离子的稳态调控,和细胞膜和细胞壁的完整性也相关.

作者:杨益;王亚楠;蒋伶活

来源:中国真菌学杂志 2017 年 12卷 3期

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作者:
杨益;王亚楠;蒋伶活
来源:
中国真菌学杂志 2017 年 12卷 3期
标签:
白念珠菌 CaCSC1基因 基因敲除 离子稳态 Candida albicans CaCSC1 gene knockout ion homeostasis
目的 构建白念珠菌CaCSC1基因的基因缺失株,并初步探究它的功能.方法 设计长引物,通过PCR直接扩增出带有SAT1 flipper的CaCSC1基因敲除盒,转化到野生型白念珠菌菌株CAI4,并通过PCR鉴定出基因型正确的转化子,得到CaCSC1的基因缺失株.最后,通过倍比稀释的方法进行表型筛选.结果 成功得到CaCSC1基因的缺失菌株.基因缺失菌株对酮康唑(Ketoconazole)敏感,对Zn2+、Mn2+和荧光增白剂(Calcofluor white)表现出耐受性.结论 CaCsc1蛋白参与对锌离子和锰离子的稳态调控,和细胞膜和细胞壁的完整性也相关.