目的： 探讨VP22的细胞间传递作用对HSV-tk/GCV杀伤肿瘤细胞的促进作用。方法： 将VP22与报告基因-绿色荧光蛋白基因（GFP）或前药酶基因-单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV-tk）构建在同一载体上，进行DNA序列分析鉴定；将此融合基因载体转染293T或COS7细胞，免疫荧光分析确定转染情况和细胞间传递作用；在前药GCV不同浓度、转染与未转染细胞比例不同时，MTT法检测细胞增殖情况；利用转染细胞培养液上清培养未转染细胞，确定旁观者效应是否由培养液转移。结果： PCR及序列分析显示融合基因插入载体正确；对293T或COS7细胞转染率可达25％～30
作者：刘春生；孔北华；马道新；王文霞；MQ Wei；KAO Ellem
来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2001 年 8卷 2期
