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目的: 研究利用聚酰胺(polyamidoamine, PAMAM)树形分子递送survivin基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxy-nucleotide, asODN)抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的效应.方法: 采用第1至第5代的聚酰胺树形分子室温下与反义survivin寡核苷酸混合制备树形分子与反义寡核苷酸的复合物(PAMAM-asODN),应用琼脂糖凝胶电泳及原子力学显微镜观察复合物的形态结构.PAMAM-asODN复合物转染HepG2细胞,同时设survivin反义寡核苷酸转染细胞作对照.共聚焦荧光显微镜检测复合物细胞转染效果;RT-PCR分析转染后细胞survivin mRNA的表达水平;MTT法检测复合物对HepG2细胞增殖的抑制效应.结果: 琼脂糖凝胶电泳分析表明,树形分子与survivin反义寡核苷酸具有高效络合作用,形成了大小为25 nm左右的复合物;共聚焦荧光显微镜检测显示,与对照相比,PAMAM-asODN复合物转染细胞的效率显著提高;RT-PCR的结果表明,转染PAMAM-asODN复合物的肿瘤细胞中survivin mRNA表达显著降低;MTT结果表明,树形分子递送survivin反义寡核苷酸进入细胞后,HepG2细胞增殖明显受抑制,增殖抑制率随培养时间、复合物浓度、树形分子代数的增加而增加,6.0 μmol/L G4.0 PAMAM-asODN与细胞培养96 h可使抑制率达55

作者:徐萍;崔大祥;潘碧峰;李清;黄拓;刘凤涛;陈浩;鲍晨晨;贺蓉;高峰

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2007 年 14卷 5期

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作者:
徐萍;崔大祥;潘碧峰;李清;黄拓;刘凤涛;陈浩;鲍晨晨;贺蓉;高峰
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2007 年 14卷 5期
标签:
纳米材料 树形分子 survivin基因 反义寡核苷酸 肝癌细胞 基因治疗
目的: 研究利用聚酰胺(polyamidoamine, PAMAM)树形分子递送survivin基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxy-nucleotide, asODN)抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的效应.方法: 采用第1至第5代的聚酰胺树形分子室温下与反义survivin寡核苷酸混合制备树形分子与反义寡核苷酸的复合物(PAMAM-asODN),应用琼脂糖凝胶电泳及原子力学显微镜观察复合物的形态结构.PAMAM-asODN复合物转染HepG2细胞,同时设survivin反义寡核苷酸转染细胞作对照.共聚焦荧光显微镜检测复合物细胞转染效果;RT-PCR分析转染后细胞survivin mRNA的表达水平;MTT法检测复合物对HepG2细胞增殖的抑制效应.结果: 琼脂糖凝胶电泳分析表明,树形分子与survivin反义寡核苷酸具有高效络合作用,形成了大小为25 nm左右的复合物;共聚焦荧光显微镜检测显示,与对照相比,PAMAM-asODN复合物转染细胞的效率显著提高;RT-PCR的结果表明,转染PAMAM-asODN复合物的肿瘤细胞中survivin mRNA表达显著降低;MTT结果表明,树形分子递送survivin反义寡核苷酸进入细胞后,HepG2细胞增殖明显受抑制,增殖抑制率随培养时间、复合物浓度、树形分子代数的增加而增加,6.0 μmol/L G4.0 PAMAM-asODN与细胞培养96 h可使抑制率达55