目的:观察survivin特异性小干扰 RNA (small interference RNA, siRNA)对P53野生型和P53缺失型肺癌细胞株的生长抑制作用, 分析肺癌细胞中survivin 与P53的相关性 . 方法 :以化学合成的survivin siRNA转染P53野生型肺癌细胞株A549和P53缺失型肺癌细胞株H1299,用MTT 法检测转染前后肺癌细胞的增殖情况,流式细胞术分析细胞周期和凋亡的改变,半定量 RT-PCR 检测转染对survivin mRNA表达的影响,Western blotting 检测survivin、 PARP、 P21、 P53等蛋白表达的变化. 结果: siRNA转染前A549 细胞中survivin表达量明显低于 H1299 细胞(P<0.05). Survivin siRNA 转染组两种细胞 survivin 蛋白及 RNA 表达水平均显著低于对照组和无关干扰组(P<0.01).Survivin siRNA 对 A549 和 H1299细胞生长抑制作用均呈浓度依赖性(P<0.05),但对H1299细胞的抑制起效晚于A549,且抑制程度低于A549细胞.转染后 A549和 H1299 细胞均有 G1 期比例增加和 S 期比例相应地减少,H1299 细胞的变化更为显著. A549 细胞有一定比例出现凋亡,PARP 发生了裂解,P53、 P21蛋白表达增加,而H1299 细胞中上述指标的变化却不明显. 结论:P53野生型 A549细胞内源性survivin表达明显低于P53缺失型H1299细胞;抑制survivin能上调P53蛋白表达,其对A549细胞的
作者:芮萌;刘长庭;段蕴铀;于晓妸;侯春梅
来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2008 年 15卷 6期