目的:研究Bestrophin 3高表达对人肝癌细胞株HepG2凋亡能力的影响,并初步探讨其作用机制.方法:将Bestrophin 3腺病毒以感染复数(multiplicity of infection,MOI) 10、20、40、80转染HepG2细胞株,Western blotting检测转染细胞内Bestrophin 3的表达,确定最佳MOI值.设对照组(未转染病毒)、LacZ组(转染携带LacZ的对照腺病毒载体)、Ad-Best3组(以最佳MOI值转染Bestrophin 3腺病毒),CCK-8法和流式细胞术分别检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞增殖、凋亡的影响,Western blotting检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞内Bcl-2、Bax以及细胞色素C表达的影响,JC-1染色观察Bestrophin 3 过表达对HepG2细胞线粒体膜电位的影响.结果:Bestrophin 3腺病毒转染HepG2细胞的最佳MOI为40,转染后细胞过表达Bestrophin 3.Ad-Best3组的细胞存活率显著低于对照组和LacZ组[(79.37±1.76)% vs(98.67±3.02)%、(99.67±3.25)%,均P<0.05],而其细胞凋亡率显著升高[(29.47±2.37)% vs (5.47±0.37)%,(4.95±0.44)%,均P<0.05].AdBest3组HepG2细胞内Bcl-2的蛋白表达显著减少,Bax的蛋白表达显著增加,导致Bcl-2/Bax比值显著降低(0.32±0.047 vs 1.00±0.00,P<0.05);Ad-Best3组HepG2细胞的线粒体膜电位显著降低[(0.64±0.09)% vs (
作者:王雷;王煜霞;姬明丽;薛会朝
来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2015 年 22卷 4期