目的:探讨人脐带来源间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cell,UC-MSC)经PI3K/AKT信号通路对人肺腺癌A549细胞凋亡和增殖的影响及其作用机制.方法:采用酶消化法从人脐带组织中分离UC-MSC并进行体外培养,用流式细胞术鉴定所得到的UC-MSC的免疫表型.收集UC-MSC培养上清,建立UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549细胞株的体外间接共培养体系.采用CCK-8法检测A549细胞增殖率,通过AnnexinV/PI染色流式细胞术检测A549细胞的凋亡率,通过PI染色法判断肿瘤细胞的细胞周期分布;qPCR实验检测CyclinD1、BAX、Bcl-2等PI3K/AKT通路下游凋亡与增殖相关基因的转录水平;Wb测定PI3K/AKT通路相关蛋白质表达水平.结果:人脐带组织分离培养3周后,可见纤维状细胞铺满培养瓶,平行排列或呈旋涡状生长.流式细胞术检测发现所得细胞表达MSC标志分子CD73、CD90、CD105,不表达CD45和HLA-DR.UC-MSC条件培养基与肺腺癌A549细胞株在体外间接共培养后,与对照组比较,A549细胞的增殖率明显降低、凋亡率明显升高,其细胞周期明显停滞在G1期(均P＜0.01).PI3K/AKT信号通路相关分子CyclinD1和Bcl-2转录下调、BAX的转录上调(均P＜0.01);UC-MSC条件培养基培养的A549细胞总AKT水平不变,p-AKT蛋白表达呈剂量性依赖下降(P＜0.01).结论:UC-MS

作者：袁哲；吴思梦；王亚君；王思亮；朱喜科

来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2019 年 26卷 3期