您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览117 | 下载0

目的:探讨长链非编码RNA CDKN2B反义RNA1 (long non-coding RNA CDKN2B-antisense RNA 1,lncRNA CDKN2B-AS通过靶向miR-7-5p影响黑色素瘤B16-F10细胞的恶性生物学行为的影响.方法:选用黑色素瘤B16-F10细胞,构建shRNA CD-KN2B-AS1载体并转染到B16-F10细胞,实验分为对照组、sh-CDKN2B-AS1组、miR-7-5p mimics组、miR-7-5p inhibitor组.用RT-PCR检测转染后B16-F10细胞中CDKN2B-AS1表达水平,用克隆形成实验和MTT法检测克隆形成数及细胞的增殖能力,用划痕愈合实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力.用荧光素酶报告基因实验检证CDKN2B-AS1和miR-7-5p相互间靶向关系.用RT-PCR和Western blotting检测转染miR-7-5p mimics、inhibitor后B16-F10细胞中miR-7-5p和Ki67、cleaved caspase-3、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、Twist1蛋白的表达水平.结果:与对照组比较,sh-CDKN2B-AS1组B16-F10细胞中CDKN2B-AS1表达水平显著下调(P<0.01),细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著下降(均P<0.01).荧光素酶报告基因实验证明CDKN2B-AS1与miR-7-5p存在靶向作用关系.sh-CDKN2B-AS1组与miR-7-5p mimics组细胞中miR-7-5p和cleaved caspase-3、E-cadherin水平均明显上调(均P< 0.05),Ki67、N-cadherin、Twis

作者:邓利丽;孙素姣;刘艳;陈燕;陈星

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2020 年 27卷 1期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:117 | 下载:0
作者:
邓利丽;孙素姣;刘艳;陈燕;陈星
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2020 年 27卷 1期
标签:
长链非编码RNA CDKN2B-AS1 miR-7-5p 黑色素瘤 B16-F10细胞 增殖 迁移 侵袭
目的:探讨长链非编码RNA CDKN2B反义RNA1 (long non-coding RNA CDKN2B-antisense RNA 1,lncRNA CDKN2B-AS通过靶向miR-7-5p影响黑色素瘤B16-F10细胞的恶性生物学行为的影响.方法:选用黑色素瘤B16-F10细胞,构建shRNA CD-KN2B-AS1载体并转染到B16-F10细胞,实验分为对照组、sh-CDKN2B-AS1组、miR-7-5p mimics组、miR-7-5p inhibitor组.用RT-PCR检测转染后B16-F10细胞中CDKN2B-AS1表达水平,用克隆形成实验和MTT法检测克隆形成数及细胞的增殖能力,用划痕愈合实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力.用荧光素酶报告基因实验检证CDKN2B-AS1和miR-7-5p相互间靶向关系.用RT-PCR和Western blotting检测转染miR-7-5p mimics、inhibitor后B16-F10细胞中miR-7-5p和Ki67、cleaved caspase-3、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、Twist1蛋白的表达水平.结果:与对照组比较,sh-CDKN2B-AS1组B16-F10细胞中CDKN2B-AS1表达水平显著下调(P<0.01),细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著下降(均P<0.01).荧光素酶报告基因实验证明CDKN2B-AS1与miR-7-5p存在靶向作用关系.sh-CDKN2B-AS1组与miR-7-5p mimics组细胞中miR-7-5p和cleaved caspase-3、E-cadherin水平均明显上调(均P< 0.05),Ki67、N-cadherin、Twis