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目的 探讨硫化氢(H2S)对肠缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠核转录因子-κB (NF-κB)及下游基因表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠24只,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、I/R组,I/R+硫氢化钠(NaHS)组(NaHS组),每组8只.NaHS组在再灌注前10 min静脉注射(静注)100 μmol/kg NaHS后按1 mg· kg-1·h-1持续静注直到再灌注2h,Sham组和I/R组静注等体积的生理盐水.用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)观察回肠上皮细胞凋亡情况,并计算凋亡指数(AI),蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测回肠组织NF-κB蛋白及NF-KB磷酸化(pNF-κB)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血白细胞介素(IL-1、IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,敏感硫电极法测定血H2S水平,动态浊度法测定血内毒素水平.采用直线相关分析法分析pNF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1与H2S、AI、内毒素及内毒素、AI与H2S的相关性.结果 Sham组未见凋亡细胞,I/R组可见较多的棕褐色凋亡回肠黏膜腺上皮细胞,AI明显增加[(39.62±4.50)%比(4.30±1.09)%].NaHS组可见较稀疏的棕褐色凋亡回肠黏膜腺上皮细胞,AI较I/R组明显降低[(24.41±2.76)%比(39.62±4.50)%,P<0.01].与Sham组比较,I/R组NF-κB蛋白表达降低(灰度值:0.82±0.08比0.87±0.07),pNF-KB(灰度值:0.82±0.07比0.15±0.

作者:卢根林;吴爱兵;王宏宾

来源:中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 3期

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卢根林;吴爱兵;王宏宾
来源:
中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 3期
标签:
缺血/再灌注,肠 硫化氢 核转录因子-κB 肿瘤坏死因子 白细胞介素 Ischemic-reperfusion Hydrogen sulfide Nuclear factor-κB Tumor necrosis factor-α Interleukin
目的 探讨硫化氢(H2S)对肠缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠核转录因子-κB (NF-κB)及下游基因表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠24只,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、I/R组,I/R+硫氢化钠(NaHS)组(NaHS组),每组8只.NaHS组在再灌注前10 min静脉注射(静注)100 μmol/kg NaHS后按1 mg· kg-1·h-1持续静注直到再灌注2h,Sham组和I/R组静注等体积的生理盐水.用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)观察回肠上皮细胞凋亡情况,并计算凋亡指数(AI),蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测回肠组织NF-κB蛋白及NF-KB磷酸化(pNF-κB)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血白细胞介素(IL-1、IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,敏感硫电极法测定血H2S水平,动态浊度法测定血内毒素水平.采用直线相关分析法分析pNF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1与H2S、AI、内毒素及内毒素、AI与H2S的相关性.结果 Sham组未见凋亡细胞,I/R组可见较多的棕褐色凋亡回肠黏膜腺上皮细胞,AI明显增加[(39.62±4.50)%比(4.30±1.09)%].NaHS组可见较稀疏的棕褐色凋亡回肠黏膜腺上皮细胞,AI较I/R组明显降低[(24.41±2.76)%比(39.62±4.50)%,P<0.01].与Sham组比较,I/R组NF-κB蛋白表达降低(灰度值:0.82±0.08比0.87±0.07),pNF-KB(灰度值:0.82±0.07比0.15±0.