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目的:从冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)表达推测参附方辅助亚低温治疗颅脑损伤的作用机制。方法将SD大鼠按随机数字表法分为非转染对照组、腺病毒介导免疫荧光逆转录病毒组(AD5-GFP转染组)及腺病毒介导携CIRP静默表达基因免疫荧光逆转录病毒组(AD5-GFP-CIRP-SiRNA转染组),每组30只;再将3组分为颅脑损伤和亚低温治疗模型组、中药低、高剂量组,每组10只。中药组于亚低温治疗48 h后经尾静脉注射参附注射液1 mL/kg(低剂量组)和5 mL/kg(高剂量组),模型组注射1 mL/kg生理盐水,均每日1次,连用2 d。两个转染组先采取病毒载体大鼠鞘内给药复制病毒转染模型〔分别一次性鞘内注射0.1 mL空白AD5-GFP和0.1 mL(1×1010 pfu/mL)AD5-GFP-CIRP-SiRNA,非转染对照组给予0.1 mL生理盐水〕。取大鼠脑皮质、海马区、下丘脑部位脑组织,用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)测定脑细胞凋亡情况,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定CIRP mRNA表达,蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)测定大鼠肉瘤蛋白(Ras)、 Ras活化相关因子(Raf)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、丝裂原活化蛋白激酶 ERK(MEK)、磷酸化MEK(p-MEK)的蛋白表达量。结果非转染对照组、AD5-GFP转染组中药低、高剂量组脑皮质、海

作者:王冠;蔡英;孙宏声;郝万平;杨栋婷;王涛丽;别鹏飞;刘佳雨;王雪岩

来源:中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 5期

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作者:
王冠;蔡英;孙宏声;郝万平;杨栋婷;王涛丽;别鹏飞;刘佳雨;王雪岩
来源:
中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 5期
标签:
颅脑损伤 亚低温 冷诱导RNA结合蛋白 细胞外信号调节激酶 参附方 Trauma brain injury Mild hypothermia Cold-inducible RNA-binding protein Extracellular regulated protein kinases Shenfu decoction
目的:从冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)表达推测参附方辅助亚低温治疗颅脑损伤的作用机制。方法将SD大鼠按随机数字表法分为非转染对照组、腺病毒介导免疫荧光逆转录病毒组(AD5-GFP转染组)及腺病毒介导携CIRP静默表达基因免疫荧光逆转录病毒组(AD5-GFP-CIRP-SiRNA转染组),每组30只;再将3组分为颅脑损伤和亚低温治疗模型组、中药低、高剂量组,每组10只。中药组于亚低温治疗48 h后经尾静脉注射参附注射液1 mL/kg(低剂量组)和5 mL/kg(高剂量组),模型组注射1 mL/kg生理盐水,均每日1次,连用2 d。两个转染组先采取病毒载体大鼠鞘内给药复制病毒转染模型〔分别一次性鞘内注射0.1 mL空白AD5-GFP和0.1 mL(1×1010 pfu/mL)AD5-GFP-CIRP-SiRNA,非转染对照组给予0.1 mL生理盐水〕。取大鼠脑皮质、海马区、下丘脑部位脑组织,用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)测定脑细胞凋亡情况,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定CIRP mRNA表达,蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)测定大鼠肉瘤蛋白(Ras)、 Ras活化相关因子(Raf)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、丝裂原活化蛋白激酶 ERK(MEK)、磷酸化MEK(p-MEK)的蛋白表达量。结果非转染对照组、AD5-GFP转染组中药低、高剂量组脑皮质、海