目的 观察脑海绵状血管瘤(CCM)致病基因CCM3基因敲除对醋酸铅诱导的永生化人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移能力的影响,并探讨可能的内质网应激(ERS)机制.方法 以野生型CCM3(CCM3-WT)和基因敲除CCM3(CCM3-KO)HUVECs为实验细胞.①分别以浓度为0、10、50、200 μmol/L醋酸铅处理2种基因型细胞24 h后,通过划痕实验观察细胞迁移情况.②取2种基因型细胞分别采用不同浓度(0、10、50、200 μmol/L)醋酸铅处理24 h和以浓度为50 μmol/L醋酸铅处理0、6、12、24、48 h后,以实时荧光定量聚合酶链式反应检测未折叠蛋白反应通路相关基因的mRNA相对表达水平,以蛋白免疫印迹法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)相对表达水平.③取2种基因型细胞分为铅染毒组和牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组,前者仅予浓度为50 μmol/L醋酸铅处理24 h,后者在采用相同浓度的醋酸铅染毒前予内质网应激抑制剂TUDCA预处理细胞,通过划痕实验观察细胞迁移功能.结果 ①CCM3-WT和CCM3-KO细胞的迁移率均呈随着醋酸铅染毒浓度的增加而下降的剂量-效应关系(P<0.05).②除10 μmol/L组CCM3-KO细胞GRP78外,10、50和200 μmol/L组CCM3-KO细胞GRP78、蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、转录激活因子4(ATF4)和CCAAT区/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的mRNA相对表达水平均分别高于
作者:陈静莉;邢秀梅;赵志强;孙易;高艳芳;何云
来源:中国职业医学 2017 年 44卷 2期