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目的 探讨Ca2+/CaN信号通路在双酚A影响巨噬细胞分泌白细胞介素6(IL-6)中的作用机制.方法 取对数生长期Raw264.7细胞分为对照组、激活剂组、3个双酚A组和抑制剂组.对照组细胞予体积分数为0.10%二甲基亚砜处理;激活剂组细胞予质量浓度为2 mg/L脂多糖处理;3个双酚A组细胞分别予终浓度为1、10、100μmol/L的双酚A处理.另设2个异搏定组和2个他克莫司(FK506)组,分别予终浓度为10、30μmol/L的异搏定或终浓度为250、500 nmol/L的FK506刺激细胞,再予终浓度为100μmol/L的双酚A组处理细胞.分别于培养4、12、24 h时间点收获细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测4、12 h时间点细胞中IL-6、钙调神经磷酸酶(CaN)的mRNA相对表达水平,采用酶联免疫吸附实验检测24 h时间点细胞IL-6和CaN蛋白相对表达水平,采用单管型多功能检测仪检测4 h时间点细胞内钙离子(Ca2+)水平.结果 在12 h时间点,IL-6 mRNA相对表达水平在100μmol/L双酚A组细胞分别高于对照组、激活剂组和1、10μmol/L双酚A组(P<0.05),均高于10、30μmol/L异搏定组和250、500 nmol/L FK506组(P<0.05).CaN mRNA相对表达水平在100μmol/L双酚A组细胞分别高于对照组、激活剂组和1、10μmol/L双酚A组(P<0.05),并高于10、30μmol/L异搏定组(P<0.05).100μmol/L双酚

作者:范峥;何秀;于海洋;段晓旭;张玉敏;马明月;段志文;裴秀丛

来源:中国职业医学 2019 年 46卷 4期

知识库介绍

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范峥;何秀;于海洋;段晓旭;张玉敏;马明月;段志文;裴秀丛
来源:
中国职业医学 2019 年 46卷 4期
标签:
双酚A 巨噬细胞 白细胞介素6 钙调神经磷酸酶 钙离子
目的 探讨Ca2+/CaN信号通路在双酚A影响巨噬细胞分泌白细胞介素6(IL-6)中的作用机制.方法 取对数生长期Raw264.7细胞分为对照组、激活剂组、3个双酚A组和抑制剂组.对照组细胞予体积分数为0.10%二甲基亚砜处理;激活剂组细胞予质量浓度为2 mg/L脂多糖处理;3个双酚A组细胞分别予终浓度为1、10、100μmol/L的双酚A处理.另设2个异搏定组和2个他克莫司(FK506)组,分别予终浓度为10、30μmol/L的异搏定或终浓度为250、500 nmol/L的FK506刺激细胞,再予终浓度为100μmol/L的双酚A组处理细胞.分别于培养4、12、24 h时间点收获细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测4、12 h时间点细胞中IL-6、钙调神经磷酸酶(CaN)的mRNA相对表达水平,采用酶联免疫吸附实验检测24 h时间点细胞IL-6和CaN蛋白相对表达水平,采用单管型多功能检测仪检测4 h时间点细胞内钙离子(Ca2+)水平.结果 在12 h时间点,IL-6 mRNA相对表达水平在100μmol/L双酚A组细胞分别高于对照组、激活剂组和1、10μmol/L双酚A组(P<0.05),均高于10、30μmol/L异搏定组和250、500 nmol/L FK506组(P<0.05).CaN mRNA相对表达水平在100μmol/L双酚A组细胞分别高于对照组、激活剂组和1、10μmol/L双酚A组(P<0.05),并高于10、30μmol/L异搏定组(P<0.05).100μmol/L双酚