目的:探讨大蒜素(alliein)抑制胰岛素(insulin)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移及其作用机制.方法:采用组织贴块法培养大鼠的VSMCs,并进行平滑肌α-肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光鉴定,取3～5代细胞进行实验.建立胰岛素刺激的VSMCs模型.实验分5组:对照组、胰岛素组、大蒜素组、ERK抑制剂PD98059组、大蒜素+PD98059组.噻唑蓝(CCK8)比色法检测VSMCs的增殖;细胞计数法检测VSMCs的迁移;免疫印迹实验(Western blotting)测定total ERK,Phospho-ERK(p-ERK),PCNA蛋白表达的情况.结果:原代培养的VSMCs生长良好,光镜下呈长梭形及“峰与谷”样生长.α-SMA免疫荧光显示培养的细胞具有典型的VSMCs特征.胰岛素能刺激VSMCs的增殖和迁移,且以100 nmol·L-1浓度时效果最明显.大蒜素预处理能显著抑制胰岛素刺激的VSMCs的增殖和迁移,且呈剂量依赖性.PD98059、大蒜素+PD98059预处理亦能显著抑制胰岛素刺激的VSMCs的增殖和迁移.胰岛素可明显促进VSMCs表达p-ERK,PCNA蛋白.大蒜素能显著抑制VSMCs表达p-ERK,PCNA蛋白,且呈剂量依赖性.结论:大蒜素能显著抑制胰岛素诱导的VSMCs的增殖与迁移,其作用机制可能是抑制ERK信号通路的激活.
作者：李婷；夏勇
来源：中国中药杂志 2014 年 39卷 20期
