目的 探讨Notch信号通路在血小板源生长因子AA(PDGF-AA)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移中的作用及机制.方法 脱臼处死1~2月龄雄性SD大鼠,无菌取腹主动脉,剥弃外膜及去除内皮后,贴块法培养VSMC,α-SM-aetin染色鉴定.实验分为四组:对照组、γ-secretase抑制剂组(DAPT组)、PDGF-AA组和PDGF-AA+γ-secretase抑制剂组(PDGF-AA+DAPT组).实时荧光定量PCR(Real-time qPCR)检测Notch信号分子mRNA表达;CellTiter96 Aqueous One Solution试剂盒检测细胞增殖活性;采用细胞划痕实验检测VSMC的迁移能力.结果 腹主动脉VSMC表达Notch信号通路Jagged1、Jagged2、Notchl~3等几种主要的配体及受体;PDGF-AA刺激24 h和48 h后分别导致Jagged2和Jaggedl mRNA表达显著增强(P<0.01,n=4);与0h相比,PDGF-AA刺激72 h后,Notch1、Notch3 mRNA表达显著增高(P<0.01,n=4),而刺激24 h后Notch2 mRNA表达显著降低.PDGF-AA显著促进HESl(P<0.05,n=4)、HEY2(P<0.05,n=4)和转录因子Rbp-jK mRNA(P<0.05,n=4)表达,DAPT抑制PDGF-AA介导的HES1、HEY2 mRNA表达增强(P<0.01,n=4),但是进一步促进PDGF-AA诱导的Rbp-jK mRNA表达(P<0.05,n=4);PDGF-AA刺激促进VSMC增殖(P<0.01,n=5)和减少划痕余留面积(P<0.01,n=4),两种效应均可被DAPT显著阻
作者:王金祥;周芳;朱光旭;刘菊芬;朱向情;康华莉;庞荣清;黄岚;潘兴华
来源:中国动脉硬化杂志 2016 年 24卷 9期