该研究探讨大黄酸(rhein,RH)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡和自噬的影响及其潜在的作用机制.用H2O2建立HUVECs的氧化损伤模型,分成不同的处理组,MTT法检测细胞生存率,Annexin V-FITC/PI双染法、Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡;Ad-mCherry-GFP-LC3B腺病毒转染法检测自噬情况;Western blot法检测蛋白表达.结果 表明RH预保护细胞,可提高H2O2损伤的HUVECs的细胞存活率,且呈剂量依赖性,减少凋亡相关蛋白Bax和cleaved caspase-3的表达,升高Bcl-2的的表达,降低Bax/Bcl-2的比值;可上调自噬标志性蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)-Ⅱ的表达,下调p62的表达.腺病毒转染结果显示,RH可使细胞绿色斑点和红色斑点增多,且黄色斑点也显著增多.而加入自噬抑制剂3-MA后,细胞自噬降低,凋亡增加.RH可使沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator 2 related enzyme 1,SIRT1)蛋白表达增加;加入SIRT1抑制剂EX-527后,可减弱大黄酸的保护作用,细胞活力降低;加入自噬抑制剂3-MA对SIRT1蛋白的表达无影响,但加入EX-527后SIRT1、LC3-Ⅱ蛋白的表达降低,p62的表达升高.经RH处理后,磷酸腺苷

作者：邹进；万子琳；姚兰；徐梦瑶；王述蓉

来源：中国中药杂志 2021 年 46卷 23期